多肽的溶解性很大程度上取決于多肽的極性

　　你知道如何溶解多肽么?不知道沒(méi)關(guān)系，今天就讓我們一起來(lái)了解一下吧。
 

　　多肽的溶解性很大程度上取決于多肽的極性。酸性的蛋白溶解于堿性溶液，而堿性蛋白可溶解于酸性溶液，含有大量不帶電荷的極性氨基酸殘基或疏水性氨基酸的疏水性多肽和中性多肽可先溶解于少量有機(jī)溶劑中，如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或異丙醇，然后加水(蒸餾水)稀釋。含有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不能用DMSO溶解，因?yàn)镈MSO可能造成側(cè)鏈氧化。
 

　　多肽溶解測(cè)試： 在多肽溶解之前先取小部分進(jìn)行多肽溶解測(cè)試，您需要測(cè)試幾種不同的溶劑，直到找到適當(dāng)?shù)囊环N。超聲處理有助于打碎顆粒并增加溶解度。(注意: 超聲處理會(huì)引起溶液發(fā)熱和多肽降解。)
 

　　將每個(gè)酸性氨基酸賦值為-1，包括天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、以及羧基末端-COOH。每個(gè)堿性氨基酸賦值為+1，包括精氨酸(R)、賴(lài)氨酸(K)、組氨酸(H)以及氨基末端-NH2。然后計(jì)算整個(gè)多肽的電荷數(shù)。
 

　　如果整段肽所帶電荷是陽(yáng)性的，說(shuō)明該肽是堿性的。可先嘗試用蒸餾水來(lái)溶解;如果不溶于水，接著嘗試用少量10%-25%醋酸溶解，如果仍然失敗的話，添加一些TFA(10-50微升)來(lái)增溶，然后用水稀釋至理想濃度。
 

　　如果整段肽所帶電荷是陰性的，說(shuō)明該肽是酸性的。酸性的多肽可以嘗試用PBS(PH 7.4)來(lái)溶解，如果不溶的話，添加少量的堿性溶劑，如0.1 M的碳酸氫銨，然后加水稀釋至理想濃度。含有游離半胱氨酸的多肽應(yīng)溶于脫氣的酸性緩沖液中，因?yàn)楫?dāng)PH值大于7時(shí)，巰基會(huì)被迅速氧化成二硫化物。
 

　　如果整段肽電荷是零，說(shuō)明肽是中性的。中性肽通常溶于有機(jī)溶劑。首先，嘗試添加少量乙腈、甲醇或異丙醇。對(duì)于高度疏水的多肽，可使用少量的二甲基亞砜溶解，然后用水稀釋至理想濃度。對(duì)于含有自由半胱氨酸的肽，需使用DMF而不是DMSO。對(duì)于有聚集傾向的肽，可添加6M鹽酸胍或8M尿素，然后進(jìn)行必要的稀釋。
 

　　為了防止或盡量減少多肽降解，請(qǐng)將多肽以?xún)龈煞坌问奖４嬖?20°C，-80°C更佳。如果需要保存溶液肽，最好分成小樣存放，以避免反復(fù)凍融。一份樣品融凍后未用完，應(yīng)扔掉。細(xì)菌降解有時(shí)會(huì)成為溶液肽的麻煩，所以請(qǐng)將肽溶于無(wú)菌水或肽溶液過(guò)濾除菌。