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        溶解多肽是非常復(fù)雜的事情一起了解一下

        更新時(shí)間:2021-04-12點(diǎn)擊次數(shù):1700
          溶解多肽是非常復(fù)雜的事情,一般很難一下子確定合適的溶劑。通常是先取一點(diǎn)試驗(yàn),在沒(méi)有確定合適的溶劑前千萬(wàn)不要全部溶解。
         
          下列方法有助于您選擇合適的溶劑:
         
          (1)判定多肽的電荷特定,設(shè)定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH為-1;堿性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2為+1,其它氨基酸的電荷為0。計(jì)算出將電荷數(shù)。
         
          (2)如果凈電荷數(shù) >0,多肽為堿性,用水溶解:如果不溶解或溶解性不大,加入醋酸(10%以上);如果多肽還不能溶解,加入少量TFA(25ul)溶解,然后加入500ul水稀釋。
         
          (3)如果凈電荷數(shù)<0,多肽為酸性,用水溶解;如果不溶解或溶解性不大,加入氨水(25ul)溶解,然后加入500ul水稀釋。
         
          (4)如果凈電荷數(shù)=0,多肽為中性,一般需要用有機(jī)溶劑如乙腈,甲醇或異丙醇,DMSO等溶解。還有人建議需要尿素來(lái)溶解疏水性很大的多肽。
         
          多肽合成需要考慮多肽的長(zhǎng)度,電荷,親疏水性等因素。長(zhǎng)度越長(zhǎng),合成粗品的純度和產(chǎn)率都隨著降低,純化的難度和無(wú)法合成的幾率就會(huì)大些。
         
          當(dāng)然多肽功能區(qū)的序列是無(wú)法改變的,但是為了多肽的順利合成,有時(shí)不得不在功能取的上下游增加一些輔助氨基酸,以改善多肽的溶解性和親疏水性。
         
          如果多肽太短,合成也可能有問(wèn)題,主要問(wèn)題是合成的多肽在后處理過(guò)程中有一定的難度,5肽以下的多肽,一般要有疏水的氨基酸,否則后處理難度加大。15個(gè)氨基酸殘基以下的多肽一般都可以得到滿意的產(chǎn)率和得率。
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